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技術(shù)文章

移液工作中的小tips

技術(shù)文章

一、移液前準(zhǔn)備

  1. 移液器選擇

    • 根據(jù)移液量的范圍選擇合適量程的移液器,一般移液量應(yīng)在移液器量程的 10% - 100%之間,以確保移液準(zhǔn)確性。例如,移取 20 - 200μL 液體,選擇 200μL 量程的移液器較為合適。

    • 考慮液體的性質(zhì)(如黏度、揮發(fā)性、腐蝕性等)選擇相應(yīng)類型的移液器。對(duì)于高黏度液體(如甘油),建議使用外置活塞式移液器;對(duì)于腐蝕性液體(如強(qiáng)酸強(qiáng)堿),需使用耐腐蝕材質(zhì)的移液器。

  2. 移液器校準(zhǔn)與維護(hù)

    • 定期對(duì)移液器進(jìn)行校準(zhǔn),一般建議每 3 - 6 個(gè)月校準(zhǔn)一次,或在移液器經(jīng)過碰撞、跌落等可能影響精度的情況后及時(shí)校準(zhǔn),確保移液量的準(zhǔn)確性。

    • 使用前后檢查移液器的密封性,可通過觀察活塞運(yùn)動(dòng)是否順暢、吸頭連接是否緊密等方法判斷。如發(fā)現(xiàn)密封不良,及時(shí)進(jìn)行維修或更換部件。

  3. 吸頭選擇與安裝

    • 根據(jù)移液器和移液量的要求選擇合適規(guī)格的吸頭,確保吸頭與移液器匹配良好。吸頭的材質(zhì)應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)要求,如對(duì)于生物樣本,建議使用無熱原、無 DNA/RNA 酶的吸頭。

    • 安裝吸頭時(shí),要確保吸頭與移液器連接緊密,無松動(dòng)??蓪⒁埔浩鞔怪辈迦胛^,然后輕輕按壓或旋轉(zhuǎn)(根據(jù)移液器類型),聽到“咔嗒"聲表示安裝到位。

二、移液操作過程

  1. 吸液技巧

    • 垂直吸液:吸液時(shí)移液器應(yīng)保持垂直,與液面保持適當(dāng)角度(一般不超過 20°),以確保吸液的準(zhǔn)確性和一致性。

    • 預(yù)潤(rùn)洗:對(duì)于高精度移液或黏性液體,建議進(jìn)行預(yù)潤(rùn)洗。即先將吸頭浸入液體中,吸取液體并排出,重復(fù) 2 - 3 次,使吸頭內(nèi)壁充分濕潤(rùn),減少液體殘留對(duì)移液量的影響。

    • 浸入深度:根據(jù)液體體積和容器類型調(diào)整吸頭浸入液體的深度。一般來說,移取小體積液體時(shí),吸頭浸入深度約為 1 - 2mm;移取大體積液體時(shí),浸入深度可適當(dāng)增加,但不宜過深,以免吸入過多液體或引起液體飛濺。

    • 緩慢吸液:吸液時(shí)要緩慢、平穩(wěn)地按下移液器按鈕,避免過快導(dǎo)致液體吸入過快,產(chǎn)生氣泡或使吸液量不準(zhǔn)確。當(dāng)液體吸入吸頭后,稍作停頓,確保液體全部進(jìn)入吸頭。

  2. 排液技巧

    • 排液位置:排液時(shí),吸頭應(yīng)緊貼容器內(nèi)壁,以實(shí)現(xiàn)液體的全部排出。對(duì)于微量移液,可將吸頭尖靠在容器內(nèi)壁的較低位置,使液體沿內(nèi)壁流下,減少殘留。

    • 分步排液:對(duì)于較大體積的液體移取,可采用分步排液的方法。先按下移液器按鈕至第一停點(diǎn),排出大部分液體,然后短暫停頓,再按下至第二停點(diǎn),排出剩余液體,確保液體排盡。

    • 避免氣泡:排液過程中要避免產(chǎn)生氣泡,可通過緩慢排液、使吸頭與容器內(nèi)壁充分接觸等方法減少氣泡的產(chǎn)生。如果出現(xiàn)氣泡,可將吸頭重新浸入液體中,緩慢排液,將氣泡排出。

三、移液后處理

  1. 吸頭棄置

    • 使用一次性吸頭時(shí),移液完畢后應(yīng)及時(shí)將吸頭棄置于專用的吸頭盒或廢物容器中,避免吸頭殘留的液體污染環(huán)境或影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

    • 對(duì)于可重復(fù)使用的吸頭,使用后要進(jìn)行清洗和消毒,清洗時(shí)要全部去除吸頭內(nèi)壁的液體殘留和雜質(zhì),消毒可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的方法(如高溫高壓滅菌、化學(xué)消毒等)。

  2. 移液器清潔與保養(yǎng)

    • 移液完畢后,用干凈的軟布或紙巾擦拭移液器外部,去除液體殘留和污漬。對(duì)于吸頭連接部位,要特別注意清潔,防止液體殘留影響下次使用。

    • 定期對(duì)移液器內(nèi)部進(jìn)行清潔和保養(yǎng),可使用移液器專用的清潔液或按照廠家推薦的清潔方法進(jìn)行操作。清潔后要確保移液器內(nèi)部全干燥,避免水分對(duì)移液器內(nèi)部部件造成腐蝕。

  3. 記錄與追溯

    • 在移液工作中,建議記錄移液的相關(guān)信息,如移液量、移液時(shí)間、移液器型號(hào)、吸頭規(guī)格等,以便在實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)問題時(shí)進(jìn)行追溯和分析。

    • 對(duì)于重要的實(shí)驗(yàn),可對(duì)移液器進(jìn)行使用記錄和校準(zhǔn)記錄的保存,確保移液過程的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。


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